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plasma清洗是怎么活化聚丙烯微孔膜?

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       基因芯片也被稱為寡核苷酸微陣列,它利用固定固相合成技術或探針固定技術將一系列不同序列的寡核苷酸固定在固相載體上。目前,DNA微陣列原位合成的載體主要是玻璃片和硅片,而聚丙烯膜、尼龍膜等聚合物微孔膜主要用于點樣生物芯片的制備。這種薄膜作為芯片載體具有較強的熒光背景,過去必須使用同位素檢測,因此不受人們的青睞。
        plasma清洗引起接枝是近年來出現的一種新型裝飾方法。它可以在短時間內(幾秒到幾分鐘)通過輝光放電形成等離子體,所需的功能基團可以直接連接到膜上。與傳統方法相比,它具有簡單的工藝和易于操作的功能基團。.基膜及接枝單體選擇范圍廣等優點。在氫氣、氮氣混合氣氛中,選用微孔聚丙烯膜作為DNA芯片原位合成的載體,對膜進行等離子體處理,通過真空完全反射紅外光譜,X輻射光電子能譜表征,確認大量氨基直接連接到微孔聚丙烯膜上。

plasma清洗



        plasma清洗接枝氨基效果的主要因素有處理時間和放電功率。如果膜片上一分子氨基與一分子的寡核苷酸發生偶聯反應,隨后所進行的脫DMT反應就有一分子的DMT被脫除下來,而DMT的稀溶液在酸性介質中符合郎伯-比爾定律,且在498nm左右有很大吸收峰。等離子體處理后表面變粗、孔徑變大而清晰,這是由于等離子體中的離子、激發態分子和自由基等各種能量的粒子與材料表面進行多種相互作用,即利用H2和N2的等離子體進行表面反應,參與反應的有激發態分子、自由基和離子,也包括等離子體輻射紫外光的作用,通過表面反應在表面引入了氨基,并產生表面侵蝕,形成交聯結構層或表面自由基。
       這些結果進一步表明氨基已經連接到薄膜表面。至于引入酰胺基團,可能是plasma清洗后薄膜表面產生活性自由基,進一步與空氣中的氧氣作用結果。也可以知道,直接轟擊面吸收峰帶明顯強于另一側,表明其上接枝氨基數量較多。含氮基團氨基和酰胺基都是在等離子體處理過程中引入的。等離子體可在微孔聚丙烯膜上引發接枝氨基,用該方法改性的基材可直接進行DNA原位合成。從DMT溶液的紫外吸光值和偶聯效率來看,明顯高于目前用氨基裝飾的玻璃片基,說明其合成的DNA探針密度遠高于功能玻璃。此外,它易于加工,預計將成為DNA原位合成的一種新型基材。


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